產(chǎn)品名稱： Sigma 胰-蛋白酶 來源于豬胰腺（Trypsin from porcine pancreas）

產(chǎn)品貨號： T4799-10G

產(chǎn)品規(guī)格：

產(chǎn)品形態(tài)：凍干粉（lyophilized powder）

產(chǎn)品等級：BioRegrade，適用于細胞培養(yǎng)-

比活度：1,000-2,000 BAEE units/mg solid

分子量：23.8 kDa

濃度：25 mg/mL

CAS號：9002-07-7

EC號：232-650-8

MDL號：MFCD00082094

運輸條件：常溫

儲存溫度：-20℃

生物來源：豬胰腺

包裝規(guī)格：5g、10g、25g、100g、500g

保質期：24個月

胰-蛋白酶Trypsin from porcine pancreas供應商：華雅思創(chuàng)

產(chǎn)品概述：

做細胞培養(yǎng)的科研人員應該都深有體會——貼壁細胞傳代是實驗室的“日常操作"，但細胞消化這一步卻常常讓人頭疼：消化時間短了，細胞不下來；消化時間長了，細胞又容易受損，活性大幅下降。更麻煩的是，不同細胞系對胰·酶的敏感度差異很大，濃度、溫度、處理時間都得反復摸索，稍有不慎整瓶細胞就廢了。

Sigma 胰-蛋白酶 來源于豬胰腺（貨號T4799-10G）就是專門來解決這些問題的。Sigma 胰-蛋白酶屬于BioReagent級別，專為細胞培養(yǎng)應用而優(yōu)化-。它能特異性切割賴氨酸和精氨·酸殘基的C末端肽段，是使貼壁細胞從培養(yǎng)表面脫落的核心工具酶-。T4799-10G作為10g規(guī)格的包裝，非常適合需要頻繁進行細胞傳代和蛋白質研究的實驗室日常使用。

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說明

General description

憑借有效的作用和對不同類型細胞的耐受性以及血清誘導的中和作用，胰-蛋白酶可用于組織解離。

Application

來自豬胰腺的胰-蛋白酶已被用于消化雞骨頭。它還被用于分離黃體內(nèi)皮細胞。。

對于胰-蛋白酶消化肽，胰-蛋白酶:肽的使用比例約為1:100至1:20。本品的典型用途是使貼壁細胞從培養(yǎng)表面脫落。 使細胞解離所需的胰-蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養(yǎng)物代數(shù)。 Trypsins也被用于細胞培養(yǎng)過程中的細胞再懸浮，在蛋白質組學研究中用于蛋白質的消化，以及在各種凝膠消化中。 其他的應用包括通過基于膜的技術評估結晶，以及在一項研究中確定蛋白質折疊速率和產(chǎn)量可以被動力學陷阱的存在所限制。

Biochem/physiol Actions

胰-蛋白酶可切割賴氨酸和精氨·酸殘基的C末端肽段。 如果酸性殘基位于切割位點的任意一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯·氨酸殘基位于切割位點的羧基側，則水解停止。 胰-蛋白酶活性的最佳pH條件為7-9。 胰-蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵。 將EDTA添加到胰-蛋白酶溶液中作為螯合劑，用于中和鈣離子和鎂離子以防止其抑制胰-蛋白酶活性。 去除這些離子會增加酶活性。

絲氨·酸蛋白酶抑制劑（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽·酶等）會抑制胰-蛋白酶。

Preparation Note

本品為凍干粉，可以25mg/mL溶于Hank′s平衡鹽。溶液。
對于需要EDTA的應用，溶解胰-蛋白酶應該使用不含Ca2+ 或 Mg2+的緩沖鹽溶液.

Other Notes

一個BAEE單位以BAEE作為底物，在25°C、pH 7.6條件下每分鐘每毫升產(chǎn)生0.001的ΔA253 。一個BTEE單位=320個ATEE單位。反應體積=3.2mL（1cm的光徑）。

胰-蛋白酶是由含223個氨基酸殘基的單鏈多肽組成的，它通過切割胰蛋-白酶原的Lys-1le肽鍵以去除N-末端六肽而獲得。 氨基酸序列通過6個二硫鍵交聯(lián)。 這是天然形式的胰蛋-白酶——β-胰蛋-白酶。 β-胰蛋-白酶可以自溶，在Lys-Ser殘基處斷裂，產(chǎn)生α-胰蛋-白酶。 胰-蛋白酶是絲·氨酸蛋白酶家族的成員。

Disclaimer

溶于1mM HCl的溶液分裝后可在-20℃穩(wěn)定保存1年。Ca2+ 的存在也會降低胰蛋-白酶的自水解性，保持其在溶液中的穩(wěn)定性。 胰蛋-白酶也將在2.0 M尿素、2.0 M鹽酸胍或0.1% (w/v) SDS中保持大部分活性。